高中生樱田纯是一个患有严重自闭症的男孩子，他拒绝去上学，成天以上网购买各种古怪东西为乐趣。负责照顾他生活起居的姐姐樱田纪对他也毫无办法。
有一天，他订购的东西又寄来了一大堆，其中有个奇怪的箱子。打开箱子，里面躺着个制作极为精巧的人偶，他尝试着转动了发条，人偶居然活了起来。她就是蔷薇少女的第五个——真红。
蔷薇少女们是神秘的人偶师罗真所制造出来的人偶，她们生下来的使命就是进行一种被称为“Alice Game”的游戏，实际上就是互相战斗并抢夺对方的“Rose Mystica”（动画中始终没有说明是什么东西，不过应该是指她们手上的那枚蔷薇指环）。被夺走Rose Mystica的那个就将失去所有力量变成一个普通的人偶娃娃，而在游戏中最后生存下来的那个就会变成为传说中完美无暇的少女Alice。
在经历了一连串事件后，纯被迫与真红订立了契约，成为了真红的“媒介”（真红管他叫仆人），也就是真红力量的来源。他们碰上了以纯的同学柏叶巴为媒介的另一个蔷薇少女雏莓，真红战胜了雏莓，但并没夺走她的Rose Mystica，而是让她解除了与巴的契约，成为了自己的仆人。之后他们又碰上了另外几个蔷薇少女——翠星石、苍星石姐妹以及水银灯。
【STAFF】
原作： PEACH-PIT
監督： 松尾 衡
シリーズ構成： 花田十輝
脚本： 花田十輝
岡田麿里
玉井☆豪
キャラクターデザイン： 石井久美
音楽： 光宗信吉
音楽製作： Mellow Head
アニメーション制作： ノーマッド

【cast】
桜田ジュン： 真田アサミ
真紅： 沢城みゆき
雛苺： 野川さくら
水銀燈： 田中理恵
桜田のり： 力丸乃りこ

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